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血液是流動在人的血管和心臟中的一種紅色不透明的粘稠液體。在血液中存在著金屬元素,而這些金屬元素對人體必不可少,影響著人類的身體健康與生長。因此本文章對人體中某些元素的濃度水平進行監測,有助于開展環境污染和職業暴露與人體健康風險的評價,同時也為臨床上某些疾病的早期診斷提供參考依據。人體檢測元素的主要樣品有血液、尿液、頭發、指甲等,其中血液因其樣品穩定、易獲得、元素濃度水平指征代表性強等特點,成為檢測相關元素富集水平的主要載體。
本文采用石墨消解的方法對樣品進行前處理消解,測定血液中的15種元素(Cd、Co、Ni、Mo、Pb、Ba、A1、Mn、Cr、Fe、P、Ca、Mg、Cu、Zn)進行測定,取得較為滿意的效果。
1、儀器與試劑
儀器:等離子體發射光譜儀、石墨消解儀
試劑:硝酸(優級純)。
本實驗所用水均為純水(電阻率為18.2MI2·cm),需配制的試劑為臨用前現配。所用器皿經20%硝酸浸泡24h后,用純水洗凈備用。
2、石墨消解樣品
石墨消解儀
采集靜脈血5m于肝素鈉抗凝真空采血管中混勻。準確吸取1ml混勻血樣、1.5ml硝酸于10ml聚四氟乙烯石墨消解管中,混勻,置于石墨消解儀消解孔中120℃恒溫消解1h,消解液約剩0.5ml時,取出冷卻后,定容至10ml,混勻樣品溶液供測定。同時做空白試驗。
3、前處理方法的選擇
由于血液基體復雜,大部分元素處于非游離狀態,與血液中的血細胞和蛋白質形成多種結合物。本法通過硝酸的消解,破壞血細胞和蛋白質,使各種元素從結合態轉變成游離態,消解后的樣品溶液澄清透明,供測定。本法對不同體積的硝酸與不同的消解溫度進行多次試驗,結果表明,硝酸與樣品的體積為1:1.5時,在石墨消解溫度為120℃、消解時間為1h的條件下處理的樣品溶液澄清透明,符合等離子體發射光譜儀檢測的要求。本實驗同時采用5%硝酸稀釋離心法對樣品進行前處理,標準樣品檢測結果表明,硝酸稀釋離心法在Fe、P、Zn等項目的檢測結果與參考值相差較大,本方法檢測結果的相對偏差滿足檢測要求。
4、石墨消解儀血液精密度測定結果
吸取1ml血液樣品6份,按上述方法使用石墨消解儀對樣品處理消解,制成樣品溶液,按本法分別平行測定6次,相對標準偏差(RSD)為0.33%一2.07%(表2),滿足檢測要求。測定結果如下表。
石墨消解儀血液精密度測定結果
5、石墨消解血液準確度及加標回收率結果
加標回收試驗吸取血液樣品1ml,按照各元素的本底含量,加入合適比例的15種元素標準溶液,做加標回收試驗,由表中可以看出,方法的回收率為85.5%~107.6%,結果令人滿意。
石墨消解血液準確度及加標回收率結果
6、實驗討論
石墨消解儀對血液進行前處理消解,有效克服或降低了檢測方法的缺點。主要表現在:石墨消解法利用濃硝酸和消解池的高溫可使樣品處理更完全,36孔設計可批量處理較大數量的樣品;本法使用試劑少,只使用硝酸和純水,降低了外源性污染的風險;分析速度快,檢出限低,線性范圍寬,多種元素可同時檢測;智能石墨消解儀采用遠程操作可以讓實驗人員遠離酸霧的傷害,實驗安全。